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如何正確清洗 HPLC 色譜柱

高效液相色譜柱液相色譜柱分為三種基本類型：液-液、液-固和離子交換。液-液柱不太受歡迎，因為它們的穩(wěn)定性有限且使用不便。在液固柱中，固定相是固體，分析物被吸收到固定相中，從而分析混合物的組成。通常，HPLC之前裝有保護柱，以保護和延長分析柱的使用壽命。保護柱的作用是去除柱中不可逆的顆粒、污染物、分子等。您還可以選擇C18堿性HPLC色譜柱、苯醚HPLC色譜柱、C8/C18標準HPLC色譜柱和其他HPLC色譜柱使用。常用的HPLC色譜柱由不銹鋼制成，但也可以由厚玻璃、聚合物（如...

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柱溫對液相色譜柱的影響

許多因素都會影響峰形和保留時間，例如色譜柱尺寸、流動相添加劑和分析物特性。在液相色譜方法開發(fā)中，柱溫是一個重要且經(jīng)常被忽視的因素。這是因為柱溫會影響峰形、保留和背壓。關(guān)于保留時間，隨著柱溫的升高，保留時間會減少。這是因為，色譜柱的溫度越高，分析物在色譜柱的固定相和流動相之間交換得越快。隨著這個過程變得越來越快，分析物的保留時間不會變長，從而導致保留時間更短，峰形通常更有效。但是，請記住，升高溫度對所有分析物的影響并不相同，這意味著保留因子對每種分析物的影響可能不同。例如，在下...

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液相色譜柱的幾項注意事項了解下

色譜柱在使用前，*好進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行（出廠測試所使用的條件是佳條件），只有這樣，測得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同。液相色譜柱的使用注意事項(1)液相色譜柱色譜柱使用前注意事項：液相色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃...

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HPLC流動相制備提示與技巧

HPLC中使用的流動相直接影響樣品中組分的保留和差異遷移，從而對樣品的分離產(chǎn)生深遠的影響。因此，正確且盡可能一致地進行流動相制備至關(guān)重要。以下是流動相制備的一些提示和技巧，可確保分離和分析的*高準確度。使用簡單的流動相使用簡單的流動相將獲得更穩(wěn)定、更易于轉(zhuǎn)移的方法。這些方法使組織受益，因為當實施可靠的方法時，故障排除和停機時間將降至最·低。使用適當?shù)燃壍娜軇┖驮噭?gòu)成流動相的組分必須具有最高純度，這一點至關(guān)重要。對于溶劑，應根據(jù)應用使用正確的牌號。當涉及到試劑時，它們必須具有...

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我可以使用 100% 水性流動相操作我的色譜柱嗎？

除非另有說明，反相柱應始終使用至少5%的有機改性劑。在95%到100%的水溶液條件下，色譜柱可能會發(fā)生去濕/相塌陷，這意味著流動相會由于表面張力而從多孔系統(tǒng)中排出。該問題通常發(fā)生在流停止時。如果色譜柱已去濕，則可以通過泵送10到20個柱體積的純甲醇/乙腈或含有至少50%有機改性劑的流動相來恢復它，但不能保證它會起作用。這種現(xiàn)象在C18和C8色譜柱中極為常見，其他反相色譜柱也應避免這種現(xiàn)象，以確保色譜的穩(wěn)定性。事實上，C8和C18鏈形成了一個非常疏水的層，所以當流動相的有機含量...

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